耐藥細胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結(jié)合大劑量間歇沖擊的方法，誘導腫瘤細胞對特定藥物產(chǎn)生耐藥性，從而建立相應的耐藥細胞系。細胞株的服務內(nèi)容包括哪些？

　　

　　1、在體外，低濃度梯度遞增結(jié)合大劑量間歇沖擊誘導細胞產(chǎn)生耐藥性。

　　

　　2、藥物對親代細胞和耐藥細胞的IC50用2。MTT法，計算耐藥指數(shù)。

　　

　　目前已知的體外建立耐藥細胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中，常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細胞化療耐藥模型。
 

　　

　　1、增加藥物濃度的方法是指用低濃度藥物刺激細胞，待細胞適應低濃度環(huán)境后，再稍微增加藥物濃度，繼續(xù)等待細胞適應當前環(huán)境。經(jīng)過反復培養(yǎng)和加壓，細胞終于可以在高濃度藥物環(huán)境中存活。

　　

　　2、大劑量藥物沖擊法是在細胞培養(yǎng)時加入超高藥物濃度的藥物，但孵育時間很短，通常只有幾分鐘。然后，將細胞轉(zhuǎn)移到無藥物培養(yǎng)液中緩慢恢復。最后，通過重復上述步驟，篩選出高倍數(shù)耐藥細胞系。

　　

　　兩種方法各有利弊：增加藥物濃度法的優(yōu)點是耐藥細胞株的藥物劑量是漸進的，細胞培養(yǎng)的外部環(huán)境是逐漸改變的，細胞更耐受，處于更好的狀態(tài)，但缺點是耐藥誘導的過程需要較長時間，其化療藥物的作用方式與大劑量、短療程化療的臨床原則不同；大劑量藥物沖擊誘導的優(yōu)點是接近臨床治療大劑量化療藥物沖擊，缺點是大劑量藥物沖擊誘導的藥物濃度很高。由于外界環(huán)境突變，細胞培養(yǎng)可能難以耐受，細胞狀態(tài)難以控制，耐藥性不穩(wěn)定。